Fluorescentie-antilichaamtechniek voor detectie van bepaalde bacteriën in een monster

Lees dit artikel voor meer informatie over Principe Fluorescence-antibody Technique voor detectie van een bepaalde bacterie in een monster!

Probeer het principe van immunofluorescentie of fluorescentie-antilichaamtechniek voor detectie van bepaalde bacteriën in een monster te leren.

Fluorescentie-antilichaam- of immunofluorescentie-techniek is een snelle en betrouwbare procedure voor de detectie van bepaalde bacteriën in een monster. Een aantal antilichamen, gemerkt met fluorescente kleurstoffen, zoals fluoresceïne-isocyanaat of isothiocyanaat, elk specifiek voor bepaalde bacteriën, is beschikbaar.

Een van deze gelabelde antilichamen, specifiek voor de specifieke te detecteren bacteriën, wordt druppelsgewijs toegevoegd aan een door hitte gefixeerd uitstrijkje van het onbekende monster bacteriën op een glaasje en voorzichtig verspreid over het oppervlak van het uitstrijkje. Een bevochtigd filterpapier wordt in een petrischaal geplaatst.

Vervolgens wordt de schuif erin geplaatst op een U-vormige glazen staaf en gedurende 35 minuten bij 25 ° C geïncubeerd. Overmaat antilichaam op het uitstrijkje wordt weggewassen met 1% fosfaat-gebufferde zoutoplossing. De schuif wordt ondergedompeld in een Coplin-pot met 1% fosfaat-gebufferde zoutoplossing bij 25 ° C gedurende 10 minuten. De dia wordt gedroogd door absorberend papier. Eén druppel glycerol wordt toegevoegd aan het uitstrijkje. Het is bedekt met een dekglaasje en onderzocht onder een fluorescentiemicroscoop.

Als de bacteriën die specifiek zijn voor het gelabelde antilichaam dat wordt gebruikt aanwezig zijn in het onbekende monster van bacteriën, wordt een antigeen-antilichaamcomplex gevormd (hier is bacteriën het antigeen). Omdat het antilichaam gelabeld is met een fluorescerende stof, emitteert het antigeen-antilichaamcomplex fluorescentie, indien waargenomen onder fluorescentiemicroscoop. Als voor het antilichaam specifieke bacteriën afwezig zijn, wordt het fluorescerende antilichaam weggewassen en wordt geen fluorescentie waargenomen.